在一般分光光度計的使用說明書上，要求儀器預熱時間約20分鐘；若是帶微處理器的分光光度計，開機后儀器自動進入自檢(初始化)狀態，約需10分鐘左右。
在分光光度計預熱這個環節上，很多使用者或多或少存在問題，如開機只預熱電路系統 (不調節波長、打開吸收池暗箱蓋預熱等)或認為初始化過程就是預熱等。
對帶微處理器有自檢功能的分光光度計，開機后儀器自檢 (初始化)結束后，在測定窗口上，設置所需波長值， 用一個吸收池裝上純凈水置于光路上，調 “0000A”后，預熱儀器，當儀器顯示讀數不再變化后即可進行測定。
對于紫外可見分光光度計，由于有雙光源 (鎢燈與氘燈)，為了延長燈的使用壽命，開機自檢完成后可以關掉測定時不用的光源燈。
